HPLC的保留值等色譜分析有關(guān)術(shù)語(yǔ)以及分配系數(shù)、分配比、塔板高度、分離度、選擇性等方面均與氣相色譜相一致;高效液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率理論也與氣相色譜一致。因液相色譜以液體代替氣相色譜中的氣體作流動(dòng)相，則速率方程H=A+B/u + Cu式中：縱向擴(kuò)散項(xiàng)(分子擴(kuò)散項(xiàng))B/u對(duì)板高的影響與氣相色譜不同，由于液相色譜中組分分子在流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)僅為氣相色譜中的萬(wàn)分之一，因此縱向擴(kuò)散項(xiàng)對(duì)板高的影響可以忽略不計(jì)于是影響液相色譜的主要因素是傳質(zhì)項(xiàng)Cu。氣相色譜(GC)的流動(dòng)相流速u增大時(shí)，板高H顯著增大(即柱效顯著降低)，而液相色譜(LC)的流速增大時(shí)。板高增大不顯著(即柱效降低不顯著)。這說(shuō)明高效液相色譜也有很高的分離效能HPLC可分離分析高極性，高分子量和離子型的各種物質(zhì)。柱效很高每米可達(dá)3萬(wàn)塊以上，一般用20 -- 25cm長(zhǎng)的柱子，由于固定相的不斷改進(jìn)，短的只有3cm ，理論板數(shù)可達(dá)3000—4000，能滿足一般分析的需要，而且具有很高的分析速度柱子短，對(duì)壓力要求就低過(guò)去高壓，現(xiàn)在追求高精度，高穩(wěn)定性，一般在室溫下操作，樣品不需預(yù)處理操作方便，容易掌握。
液相色譜非常適合分子量較大，難氣化;不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)，離子型化合物及高聚物的分離分析，大約占有機(jī)物的70～80%氣相色譜的流動(dòng)相載氣是色譜惰性的性氣體，不參與分配平衡過(guò)程,與樣品分子無(wú)親和作用，樣品分子只與固定相相互作用。而在液相色譜中流動(dòng)相是各種低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑及水溶液。也參與樣品分子相互作用，因此液相色譜流動(dòng)相的作用比氣相色譜大，氣相色譜的載氣僅數(shù)種，其性質(zhì)差別也不大，對(duì)分離效果影響也不大。而液相色譜的流動(dòng)相種類多，性質(zhì)差別也大，對(duì)分離效果影響顯著。因?qū)τ贚C來(lái)說(shuō)，流動(dòng)相的選擇很重要，為提高選擇性增加了一個(gè)因素。液相色譜也可選用不同比例的兩種或兩種以上的液體作流動(dòng)相,增大分離的選擇性。
液相色譜能完成難度較高的分離工作.就其分離機(jī)理的不同，高效液液相色譜能完成難度較高的分離工作.就其分離機(jī)理的不同，高效液液相色譜能完成難度較高的分離工作.就其分離機(jī)理的不同，高效液液相色譜能完成難度較高的分離工作.就其分離機(jī)理的不同，高效液液相色譜能完成難度較高的分離工作.就其分離機(jī)理的不同，高效液相色譜可分為液-固吸附色譜;液-液分配色譜;離子交換色譜和凝膠滲透色譜等多種類型。液—固色譜的色譜柱內(nèi)填充固體吸附劑，由于不同組分具有不同的吸附能力。因此，流動(dòng)相帶著被測(cè)組分經(jīng)過(guò)色譜柱時(shí)，各組分被分開(kāi)液—液色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體。作為固定相的液體涂在惰性擔(dān)體上，流動(dòng)相與固定液不互溶，當(dāng)帶有被測(cè)組分的流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱時(shí)，組分在兩相間很快達(dá)分配平衡，由于各組分在兩相間分配系數(shù)不同而彼此分離。以非極性溶液作流動(dòng)相,極性物質(zhì)作固定相的液—液色譜叫正相色譜;極性溶液作流動(dòng)相，非極性物質(zhì)作固定相的液—液色譜叫反相色譜。離子交換色譜的色譜柱內(nèi)填充離子交換樹(shù)脂，依靠樣品離子交換能力的差別實(shí)現(xiàn)分離。而凝膠色譜是按試樣中分子大小的不同來(lái)進(jìn)行分離的。在上述四類色譜中，應(yīng)用較廣泛的是液—液色譜。液相色譜作為分析時(shí)選擇余地大，而氣相色譜達(dá)不到。
