高效液相色譜儀主要由色譜泵及控制器、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和數(shù)據(jù)處理及控制五大部分組成，分離原理是一個(gè)物理過程，流動相攜帶著待分析化合物和其他一些共存物質(zhì)流過色譜柱，利用不同物質(zhì)在固定相上的保留時(shí)間不同，從而出峰時(shí)間不同而達(dá)到分離，利用保留時(shí)間定性，峰高或者峰面積定量，在將分離后的各個(gè)成分依次通過一紫外檢測器時(shí)就可檢測出各化合物的濃度來。
高效液相色譜法有“三高一廣一快”的特點(diǎn)：
1、高壓：流動相為液體，流經(jīng)色譜柱時(shí)，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。
2、高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達(dá)到分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
3、高靈敏度：紫外檢測器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級。
4、應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢。
5、分析速度快、載液流速快：較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個(gè)樣品在15～30 min，有些樣品甚至在5min內(nèi)即可完成，一般小于1h。此外HPLC還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)。
