今天讓我們一起來(lái)了解一下影響毛細(xì)管電泳儀分離因素的原因，話不多說(shuō)下面讓我們來(lái)了解一下吧。
1、緩沖液
緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定，在相同的pH下，不同緩沖試劑的分離效果不盡相同，有的可能相差甚遠(yuǎn)。CE中常用的緩沖試劑有:磷酸鹽、硼砂或硼酸、醋酸鹽等。
毛細(xì)管電泳儀
緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質(zhì)的離子強(qiáng)度，從而影響Zeta電勢(shì)，而Zeta電勢(shì)的變化又會(huì)影響到電滲流。緩沖液濃度升高，離子強(qiáng)度增加，雙電層厚度減小，Zeta電勢(shì)降低，電滲流減小，樣品在毛細(xì)管中停留時(shí)間變長(zhǎng)，有利于遷移時(shí)間短的組分的分離，分析效率提高。同時(shí)，隨著電解液濃度的提高，電解液的電導(dǎo)將大大高于樣品溶液的電導(dǎo)而使樣品在毛細(xì)管柱上產(chǎn)生堆積的效果，增強(qiáng)樣品的富集現(xiàn)象，增加樣品的容量，從而提高分析靈敏度。
但是，電解液濃度太高，電流增大，由于熱效應(yīng)而使樣品組分蜂形擴(kuò)展，分離效果反而變差。此外，離子還可以通過(guò)與管壁作用以及影響溶液的粘度、介電常數(shù)等來(lái)影響電滲，離子強(qiáng)度過(guò)高或過(guò)低都對(duì)提高分離效率不利。
2、pH值
緩沖體系pH的選擇依樣品的性質(zhì)和分離效率而定，是決定分離成敗的一大關(guān)鍵。不同樣品需要不同的pH分離條件，控制緩沖體系的pH值，一般只能改變電滲流的大小。
pH能影響樣品的解離能力，樣品在極性強(qiáng)的介質(zhì)中離解度增大，電泳速度也隨之增大，從而影響分離選擇性和分離靈敏度。pH還會(huì)影響毛細(xì)管內(nèi)壁硅醇基的質(zhì)子化程度和溶質(zhì)的化學(xué)穩(wěn)定性，pH在4-10之間，硅醇基的解離度隨pH的升高而升高，電滲流也隨之升高。因此，pH為分離條件優(yōu)化時(shí)不可忽視的因素。
3、分離電壓
在CE中，分離電壓也是控制電滲的一個(gè)重要參數(shù)。高電壓是實(shí)現(xiàn)CE快速、高效的前提，電壓升高，樣品的遷移加大，分析時(shí)間縮短，但毛細(xì)管中焦耳熱增大，基線穩(wěn)定性降低，靈敏度降低;分離電壓越低，分離效果越好，分析時(shí)間延長(zhǎng)，峰形變寬，導(dǎo)致分離效率降低。
因此，相對(duì)較高的分離電壓會(huì)提高分離度和縮短分析時(shí)間，但電壓過(guò)高又會(huì)使譜帶變寬而降低分離效率。電解質(zhì)濃度相同時(shí)，非水介質(zhì)中的電流值和焦耳熱均比水相介質(zhì)中小得多，因而在非水介質(zhì)中允許使用更高的分離電壓。
4、溫度
溫度影響分離重現(xiàn)性和分離效率，控制溫度可以調(diào)控電滲流的大小。溫度升高，緩沖液粘度降低，管壁硅輕基解離能力增強(qiáng)，電滲速度變大，分析時(shí)間減短，分析效率提高。但溫度過(guò)高，會(huì)引起毛細(xì)管柱內(nèi)徑向溫差增大，焦耳熱效應(yīng)增強(qiáng)，柱效降低，分離效率也會(huì)降低。
5、添加劑
在電解質(zhì)溶液中加入添加劑，例如中性鹽、兩性離子、表面活性劑以及有機(jī)溶劑等，會(huì)引起電滲流的顯著變化。
表面活性劑常用作電滲流的改性劑，通過(guò)改變濃度來(lái)控制電滲流的大小和方向，但當(dāng)表面活性劑的濃度高于臨界膠束濃度時(shí)，將形成膠束。
加入有機(jī)溶劑會(huì)降低離子強(qiáng)度，Zeta電勢(shì)增大，溶液粘度降低，改變管壁內(nèi)表面電荷分布，使電滲流降低。在電泳分析中，緩沖液一般用水配制，但用水一有機(jī)混合溶劑常常能有效改善分離度或分離選擇性。
